NIBSC89/548介白素6采用的是雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定樣品中人白細胞介素-6(IL-6)的水平。向預(yù)先包被了人白細胞介素-6(IL-6)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入白細胞介素-6(IL-6)，溫育；洗滌后，加入HRP標(biāo)記過的白細胞介素-6(IL-6)抗體。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入底物A、B，產(chǎn)生藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺與樣品中人白細胞介素-6(IL-6)的濃度呈正相關(guān)。
 

　　NIBSC89/548介白素6注意事項：
 

　　1.從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
 

　　2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差
 

　　3.建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再按說明書操作進行測定，計算時請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
 

　　4.嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
 

　　5.為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
 

　　6.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
 

　　7.底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。
 

　　NIBSC89/548介白素6手工洗板方法：甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。